Пропитка для стен: Предварительная обработка перед покраской – советы по самостоятельному ремонту от Леруа Мерлен в Москве

Abstract
Повышенная влажность из-за воздействия проливного дождя на неотсыпанные кирпичные стены может привести к морозным повреждениям или ускоренному разрушению открытого фасада.Кроме того, в случае монолитных наружных стен, которые часто встречаются в исторических зданиях, высокое содержание воды снижает и без того низкое тепловое сопротивление стены, что приводит к плохим гигиеническим условиям в помещении. Поскольку внешний вид фасада в целом должен оставаться неизменным по эстетическим соображениям, очевидной мерой для улучшения влагозащиты и термических качеств кирпичной кладки является пропитка водоотталкивающими агентами, возможно, в сочетании с внутренней изоляцией.В ходе полевых испытаний было изучено влияние пропитки силоксаном на влажность открытой кирпичной кладки с трещинами и без них в сравнении с необработанными, а также с защищенными фасадами. Во всех случаях пропитка открытых стеновых элементов повышенной влажностью приводила к процессу высыхания, который приводил к низкому содержанию воды, аналогичному условиям влажности укрытых фасадов. Сушка пропитанных стеновых элементов толщиной 24 см занимает около года. Поскольку монолитные кирпичные стены исторических зданий в основном более толстые, для типовых стен были выполнены дополнительные расчеты переноса тепла и влаги.В зависимости от внутренней отделки (например, инсульта) таких кирпичных стен время высыхания после пропитки составляет от 2 до 7 лет. Во избежание повреждений от мороза или длительного высыхания внутренней изоляции лучше всего наносить внутреннюю изоляцию через некоторое время после пропитки.

Диффузия растворенного вещества в стенки ячеек пропитанной раствором древесины в процессе кондиционирования III: влияние режима относительной влажности на диффузию растворенного вещества в сужающиеся стенки ячеек | Journal of Wood Science

Процесс пробоподготовки и пропитки

Двадцать семь поперечных образцов с размерами 5 мм × 25 мм × 25 мм в продольном (L), радиальном (R), тангенциальном (T) направлениях соответственно , впоследствии были приготовлены из блока хиноки ( Chamaecyparis obtusa ).Образцы были пропитаны деионизированной водой и оставлены в ней на 2 месяца, а их масса и площадь в поперечном сечении КТ ( м _A и s _A соответственно). Их кондиционировали при относительной влажности 60% (20 ° C) в течение более 2 недель, а затем сушили при 105 ° C до относительно постоянной массы, м _O , их площадь поперечного сечения RT, с _O , и объем, v _O , а их средняя плотность при сушке в печи составляла 0.379 ± 0,003 г / см ³ . Высушенные образцы пропитывали водным раствором полиэтиленгликоля (PEG1540, E.P., Wako) с концентрацией 20 мас.% И оставляли в растворе на 5 месяцев.

Процесс кондиционирования

Закрытые контейнеры диаметром 88 мм и высотой 109 мм внутри были приготовлены в камере (Стандартная промышленная печь, PV-211, Espec Co.) с температурой внутри, контролируемой на уровне 40 ° C. Температура в этом исследовании отличалась от таковой в предыдущих исследованиях и составляла 35 ° C [4, 6–8].Это произошло потому, что камера, использованная в этом исследовании, была изменена по сравнению с камерой в предыдущих исследованиях, а также потому, что температура в камере в этом исследовании была более стабильной, когда она контролировалась на уровне 40 ° C, чем при 35 ° C при комнатной температуре 20 ° C. –25 ° С. Атмосфера внутри контейнера контролировалась при относительной влажности 11, 32, 53, 66, 75 или 89% с температурой 40 ° C с использованием насыщенного водного раствора хлорида лития (LiCl), хлорида магния (MgCl ₂ ), натрия бромид (NaBr), иодид калия (KI), хлорид натрия (NaCl) или нитрат калия (KNO ₃ ) соответственно [23], над которыми пропитанные образцы можно подвешивать для кондиционирования.

Три пропитанных образца кондиционировали при относительной влажности 11, 32, 53, 75 или 89% (40 ° C) в течение 2,17 × 10 ³ ч с последующей сушкой в ​​вакууме над пентоксидом фосфора (P ₂ О ₅ ). Площадь поперечного сечения RT, с ( t ), как функция времени кондиционирования, t , была измерена, и относительное набухание, r ( t ), было рассчитано с использованием следующего уравнения .

$$ r (t) = \ frac {{s (t) — {s _ {\ rm {O}}}}} {{{s _ {\ rm {A}}} — {s _ {\ rm {O }}}}} {\ rm {.}} $$

(11)

Масса образцов после сушки в вакууме, м _V , измеряли для расчета прироста в процентах по массе (WPG) высушенных образцов с использованием следующего уравнения.

$$ {W _ {\ rm {V}}} = \ frac {{100 ({m _ {\ rm {V}}} — {m _ {\ rm {O}}})}} {{{m_ { \ rm {O}}}}} {\ rm {}} [{\ rm {}} \% {\ rm {}}] {\ rm {}} {\ rm {.}} $$

(12)

Временная изменчивость r ( t ) показана на рис.4. Было подтверждено, что образец демонстрирует максимальное набухание при кондиционировании при относительной влажности 75%. Значения Вт _V составляли 39,9 ± 0,3, 40,1 ± 0,2, 39,4 ± 0,3, 39,3 ± 0,4 и 39,5 ± 0,6% для относительной влажности 11, 32, 53, 75 и 89% соответственно. Это подтверждает, что общее количество ПЭГ в каждом образце после кондиционирования не так сильно различается среди всех RH.

Временная изменчивость относительного набухания пропитанного образца во время кондиционирования в первом сроке. Планки погрешностей стандартное отклонение

Чтобы прояснить влияние количества шагов снижения относительной влажности при кондиционировании пропитанной древесины в течение единого периода, другие наборы из двенадцати пропитанных образцов кондиционировали при подтвержденной относительной влажности 75% (40 ° C) для 2,18 × 10 ³ ч, а затем кондиционирование при 40 ° C по четырем схемам, включая 1, 2, 3 или 5 шагов снижения относительной влажности, называемых схемами A, B, C или D, соответственно (рис. 5). График А содержал относительную влажность 75% для 1.28 × 10 ³ ч, относительная влажность B 53% для 1,28 × 10 ³ ч, относительная влажность C 66% для 4,33 × 10 ² часов и 32% для 8,43 × 10 ² часов и D RH 66% для 1,00 × 10 ² ч, 53% для 3,34 × 10 ² ч, 32% для 4,82 × 10 ² ч и 11% для 3,61 × 10 ² ч, где заключительный шаг во всех схемах была сушка в вакууме над P ₂ O ₅ . Масса и площадь поперечного сечения RT во время кондиционирования, м ( t ) и с ( t ), соответственно, а после кондиционирования м v и с _V соответственно.Относительное набухание, r ( t ), и содержание влаги, M ( t ), пропитанных образцов при кондиционировании рассчитываются с использованием уравнения. (11) и следующее уравнение соответственно.

График кондиционирования относительной влажности (RH) в этом исследовании

$$ M (t) = \ frac {{100 \ left \ {{m (t) — {m _ {\ rm {V}}}} \ right \}}} {{{m _ {\ rm {V}) }}}} {\ rm {}} [{\ rm {}} \% {\ rm {}}] {\ rm {}} {\ rm {.}} $$

(13)

Относительное набухание и WPG после сушки в вакууме, r _V и W _V , были рассчитаны с использованием следующего уравнения и уравнения. (12) соответственно.

$$ {{r} _ {\ text {V}}} = \ frac {{{s} _ {\ text {V}}} — {{s} _ {\ text {O}}}} { {{s} _ {\ text {A}}} — {{s} _ {\ text {O}}}} \ text {.} $$

(14)

Значения Вт _В было 39.8 ± 0,2, 39,6 ± 0,4, 40,1 ± 0,1 и 39,9 ± 0,7% для графиков A, B, C и D соответственно. Это подтверждает, что общее количество ПЭГ в каждом образце после кондиционирования не так сильно различается для всех режимов.

Пропитка наружных стен силиконом, सिलिकॉन कोटिंग — DurabuildCare Pvt Ltd, Дели

О компании

Год основания 1998

Юридический статус компании с ограниченной ответственностью (Ltd./Pvt.Ltd.)

Характер бизнеса Производитель

Количество сотрудников От 51 до 100 человек

Годовой оборот 25-50 крор

Участник IndiaMART с августа 2011 г.

GST07AABCD1625L1ZS

DuraBuild, основанная в 1998 году, является одним из лидеров в области производства строительной химии. Наш специализированный портфель из 250+ строительных химикатов гарантирует, что мы выполним все ваши сложные требования по практичным и дифференцированным ценам, а также предоставим решения, которые отлично работают на протяжении всего жизненного цикла проекта.

Наш основатель и председатель, ныне покойный доктор Дхананджай Ганти, был широко известен как «первый химик в области строительной химии» Индии. Он был пионером в области технологии бетона и строительной химии за свои 35 лет сотрудничества с различными транснациональными корпорациями и известными инженерными институтами. Мы ждем от него вдохновения и продвигаем вперед его почитаемое наследие.

Наша престижная разнообразная клиентура по всей Индии свидетельствует о наших инновационных решениях и расходах на НИОКР, на которые приходится 7% наших продаж при среднемировом уровне 5%.Наши производственные подразделения, расположенные соответственно в Харьяне (2) и Карнатаке (1), находятся под эгидой лаборатории доктора Ганти, которая является нашим инновационным подразделением и центром разработки продукции, обслуживающим промышленность с 1980 года.

Видео компании

Полимеры | Бесплатный полнотекстовый | Пригодность различных вариантов пропитки полиэтиленгликолем для стабилизации размеров древесины дуба

1.Введение

Услуги по вакуумной пропитке и герметики

В течение многих лет пористость была серьезной проблемой в процессе литья металла.Пористость в отливке может возникать из-за пузырьков газа, которые образуются при затвердевании расплавленного металла — это может привести к утечке под давлением, делая готовую отливку практически непригодной для использования.

Вакуумная пропитка, также известная как герметизация пористого металла или герметизация пористости, представляет собой процесс, используемый для герметизации пористости в металлических отливках посредством приложения вакуумного давления. Вакуумная пропитка может быть эффективной для устранения микропористости и макропористости. Микропористость ограничена стенками отливки, в то время как макропористость принимает форму более крупных трещин или трещин, которые видны на внешних стенках.

Основы вакуумной пропитки

Вакуумная пропитка заключается в удалении из отливки воздуха, который присутствует во время затвердевания. Затем пустота заполняется прочным материалом, чтобы создать герметичное уплотнение. При правильном выполнении вакуумная пропитка герметизирует пористость, не изменяя структуру или внешний вид отливки каким-либо заметным образом.

Этапы процесса вакуумной пропитки

Этапы типичного процесса вакуумной пропитки включают:

• Поместите отливку в специально разработанную камеру для пропитки и используйте вакуум под давлением для удаления воздуха.На этом этапе путь утечки также заполняется герметиком.
• Перемещение отливки на станцию ​​восстановления, где излишки герметика собираются для повторного использования в будущих процессах вакуумной пропитки.
• Смыть остатки герметика с отливки, поместив ее в моечную станцию.
• Перемещение отливки на станцию ​​отверждения, где пропитанный герметик полимеризуется на пути утечки.

Типы герметиков для вакуумной пропитки

Существует три типа герметиков, которые можно использовать при вакуумной пропитке:

• Анаэробный — Анаэробный герметик обычно используется с металлическими порошками, кабелями и компонентами с формованием поверх.Анаэробные герметики используют ионы металлов для каталитической реакции. Герметик восстанавливается в центрифуге во время процесса пропитки. Эти герметики требуют 48 часов отверждения перед испытанием под давлением.
• Термореактивный восстанавливаемый герметик — Термореактивный восстанавливаемый герметик используется для отливок, кабелей, порошковых металлов и графитовых деталей. С этим типом герметика тепло служит стимулом для разрушения инициатора пористости. Герметик восстанавливается внутри камеры пропитки после использования, и любой неиспользованный герметик остается неизменным.
• Термореактивный рециклируемый — Как и в случае термореактивного восстанавливаемого герметика, для разрушения инициатора пористости используется тепло. Однако герметик просто перерабатывается, и никаких дополнительных операций по восстановлению не требуется. Этот вид герметика лучше всего использовать для отливок и порошковых металлов.

Отрасли, которым может быть полезна вакуумная пропитка

Процесс вакуумной пропитки может быть полезен для деталей, используемых в производстве автомобилей и тяжелых грузовиков, а также в авиационной и оборонной промышленности.Его также можно использовать с широким спектром обычных промышленных деталей, таких как насосы, графитовые пластины и регулирующие клапаны. Основные преимущества: отличная герметичность, высокая химическая и температурная стойкость, а также отсутствие неприятного запаха. Вакуумная пропитка составляет лишь небольшую часть общих затрат на литье, что делает ее чрезвычайно рентабельной.

Методы вакуумной пропитки металлов

Существует несколько широко применяемых методов вакуумной пропитки металлических уплотнений, в том числе:

• Сухой вакуум и давление -Этот метод включает в себя размещение деталей внутри сосуда высокого давления, а также создание и поддержание вакуума до тех пор, пока весь воздух не будет удален из пористости.Затем герметик переносится в сосуд высокого давления. После сброса вакуума создается атмосферное давление, которое поддерживается в течение достаточно длительного периода времени, чтобы обеспечить проникновение в пористость.
• Мокрая пропитка в вакууме — При этом методе вакуумной пропитки металлических уплотнений детали погружаются в герметик, после чего создается вакуум в течение периода времени, достаточного для деаэрации. Затем детали оставляют впитываться в герметик до полного проникновения пористости.
• Внутренняя пропитка — В этом процессе деталь фактически служит сосудом. Деталь заполняется герметиком, при этом весь захваченный воздух тщательно удаляется. Затем герметик подвергается давлению до тех пор, пока он не начнет «вытекать» из детали. Заключительные шаги включают снижение давления и слив оставшегося герметика.
• Пропитка в вакууме и под давлением — Этот метод вакуумной пропитки для металлического уплотнения предполагает использование одного сосуда, но не резервуара для хранения.Детали погружаются в герметик, после чего создается вакуум. Давление поддерживается до полного проникновения пористости. Этот метод обычно требует больших вложений в оборудование, чем стандартный мокрый вакуумный процесс.

Преимущества использования вакуумной пропитки для герметизации металлов

Преимущества вакуумной пропитки металлических уплотнений:

• Постоянное уплотнение деталей, предотвращающее растрескивание и разрушение
• Устранение утечек и связанных с ними потерь производственного времени и денег в результате утечки продукции
• Увеличение срока службы металлических деталей
• Значительное сокращение лома и отходов
• Нет необходимости в производственных испытаниях

Если вы можете воспользоваться услугами вакуумной пропитки, свяжитесь с Sharretts Plating или запросите бесплатное ценовое предложение!

Доставка фактора роста эндотелия сосудов человека с платиновыми спиралями усиливает утолщение стенки и пропитку спирали в модели аневризмы крысы фиброз преимущественно на периферии аневризмы.Мы предположили, что фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), высвобождаемый из спирали, способствует организации сгустка, гиперплазии и пролиферации эндотелия, облегчая закрытие шейки аневризмы.

МЕТОДЫ: сегментов GDC вставляли в перевязанные общие сонные артерии (ОСА) взрослых самцов крыс на 14 дней. Сегменты спирали (4 мм) не были модифицированы, модифицированы коллагеном I типа (2,4 мг / мл) или модифицированы коллагеном I типа и рекомбинантным человеческим VEGF-165 (rhVEGF; 500 мкг / мл).Сегменты CCA были собраны и катушки удалены для сканирующей электронной микроскопии (SEM).

РЕЗУЛЬТАТЫ: спиралей коллаген / rhVEGF (n = 11) привели к заметному уменьшению площади просвета CCA (0,03 мм ² ) по сравнению со спиралями (n = 9, 0,21 мм ² , P <0,001 ) и коллагеновых спиралей (n = 5, 0,13 мм ² , P <0,001). Спирали коллаген / rhVEGF (n = 11) также привели к заметному уменьшению диаметра ОСА (0,19 мм) по сравнению со спиралями (n = 9,0.50 мм, P <0,001) и коллагеновых спиралей (n = 5, 0,40 мм, P <0,001). Толщина стенки была больше для сегментов спиралей коллаген / rhVEGF (0,22 мм) по сравнению со спиралями (0,09 мм, P <0,001) и коллагеновых спиралей (0,15 мм, P = 0,06). Сегменты CCA, содержащие спирали коллаген / rhVEGF, также демонстрировали положительность фактора VIII и были полностью инкапсулированы в фиброзную ткань, в то время как немодифицированные спирали и спирали коллагена были по существу гладкими, как видно с помощью SEM.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Эти результаты предполагают, что rhVEGF может быть полезным в стимулировании эндотелизации, организации сгустка и интеграции спиралей в ткань. Это первое исследование, в котором выдвинута гипотеза о том, что rhVEGF может быть полезен в качестве поверхностной модификации GDC для усиления их терапевтического эффекта при лечении аневризм головного мозга.

Съемные спирали Гульельми (GDC) широко используются при лечении внутричерепных аневризм. Несмотря на то, что они успешно использовались в подгруппе пациентов с аневризмой, платиновые микрокатушки относительно биологически неактивны.Повышение их способности вызывать тромбоз, образование тромбов и, в конечном итоге, закрытие шейки аневризмы может привести к улучшению терапевтических результатов. Следовательно, в последнее время проявился интерес к модификации поверхности платиновых GDC, чтобы способствовать тромбозу и пролиферации эндотелиальных клеток и, таким образом, сократить время, необходимое для окклюзии аневризмы (1-7). Спирали были модифицированы путем покрытия поверхности GDC белками внеклеточного матрикса (коллаген, ламинин, фибронектин), небиоразлагаемыми полимерами (полиэфиры, полиуретаны) и фибробластами, а также ионной пропиткой платиной.

Фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) — это гепарин-связывающий гликопротеин, который также действует как фактор проницаемости сосудов (8, 9). VEGF продуцируется макрофагами, эндотелиальными клетками и гладкомышечными клетками (9) и в настоящее время интенсивно исследуется на предмет его терапевтической эффективности в повышении коллатерального кровотока в областях ишемии миокарда. В настоящем исследовании мы выдвинули гипотезу о том, что для больших аневризм трудно полностью окклюзировать после терапии GDC, потому что сами по себе спирали не обеспечивают достаточной механической или биологической поддержки, чтобы способствовать закрытию шеи.Кроме того, большие сгустки внутри спиральных аневризм могут не обеспечивать достаточный перенос кислорода и становиться ишемическими или некротическими. Следовательно, фактор, способствующий ангиогенезу, такой как VEGF, может усиливать фиброз и последующую облитерацию аневризмы в аналогичной гемодинамической среде. Целью этого исследования было определение возможности использования платиновых спиралей, покрытых рекомбинантным человеческим VEGF (rhVEGF), в модели артериального застоя при артериальном давлении in vivo.

Методы

Подготовка спиралей

В стерильных условиях съемные спирали Гульельми Т-10 (Target Therapeutics, Freemont, CA) разрезали на 4-миллиметровые сегменты.T-10 GDC имеет диаметр 0,2 мм (0,008 дюйма) и площадь поперечного сечения 0,049 мм ² . Сегменты были либо немодифицированными (спираль), либо покрыты коллагеном (спираль + коллаген), либо покрыты коллагеном, содержащим rhVEGF (спираль + коллаген / rhVEGF). Сегменты спирали покрывали очищенным, солюбилизированным пепсином, бычьим кожным коллагеном типа I (3,0 мг / мл), растворенным в 0,012 н. HCl (Vitrogen, Cohesion Technologies, Пало-Альто, Калифорния). Раствор коллагена был приготовлен из 800 мкл л этого раствора коллагена, 100 мкл л 0.1 н. NaOH и 100 мкл л 10-кратного фосфатно-солевого буфера (фосфатно-солевой буфер Дульбекко; Gibco BRL, Гранд-Айленд, штат Нью-Йорк) и тщательно перемешали (pH = 6,8). Сегменты спирали погружали в раствор (2,4 мг / мл коллагена) и инкубировали при 37 ° C в течение 1 часа для полимеризации, а затем сушили на воздухе в стерильном вытяжном шкафу с ламинарным потоком в течение 1 часа. Сразу после сушки спирали выдерживали в стерильной среде и вставляли в перевязанную общую сонную артерию (ОСА) крысы.

Для покрытия VEGF аликвоту 100 мкл л 5 мг / мл rhVEGF (rhVEGF-165; Genentech, Сан-Франциско, Калифорния) добавляли к 900 мкл л раствора коллагена и тщательно перемешивали до конечного результата. концентрация 500 мк г / мл (pH = 6.9). Сегменты спирали погружали в раствор коллаген / rhVEGF и инкубировали при 37 ° C в течение 1 часа для полимеризации, после чего спирали затем сушили на воздухе в стерильном вытяжном шкафу с ламинарным потоком в течение 1 часа. Сразу после того, как они были высушены, спирали выдерживали в стерильной среде и вставляли в ОСК крысы.

Хирургия животных и установка спиралей

Все процедуры были одобрены Комитетом по нормативным вопросам Университета Пенсильвании. Крысам Sprague-Dawley (375–425 г) давали доступ к пище и воде ad libitum перед тем, как вызвать анестезию путем внутрибрюшинной инъекции пентобарбитала натрия в дозе 60 мг / кг.После индукции анестезии животных держали на грелке и поддерживали при 37 ° C в течение всей процедуры и периода немедленного восстановления. В положении лежа на спине производили правый парамедианный разрез от угла нижней челюсти до области средней ключицы. Поверхностный лицевой и мышечный слои были разделены тупым рассечением до визуализации сонного пучка. ОСА была скелетирована, постоянная лигатура была помещена проксимальнее бифуркации ОСА, а временная лигатура была помещена на 1 см дистальнее начала ОСА (рис. 1А).После получения проксимального контроля ОСА с помощью временной лигатуры была выполнена небольшая артериотомия на 2 мм проксимальнее дистальной лигатуры. Сегмент спирали был вставлен в ОСА, а новая лигатура была помещена чуть дистальнее артериотомии, чтобы исключить ее из кровотока (рис. 1В). Временная лигатура была освобождена, чтобы восстановить кровоток в сегменте сонной артерии. Операционное поле было проверено, чтобы убедиться, что последняя лигатура поддерживает гемостаз и что спираль надежно закреплена во вновь созданном мешочке с слепым концом (рис. 1B).Рана закрывалась, животных возвращали в клетки и давали им возможность восстановиться в течение 14 дней. Заметная вазодилатация проксимальнее второй постоянной лигатуры снова была отмечена после удаления временной лигатуры.

A, Выявление ОСА, показывающее временные проксимальные и постоянные дистальные лигатуры.

B, Катушка вставлена ​​в ОСА, постоянная лигатура размещена проксимальнее артериотомии, временная лигатура освобождена.

Уборка сосуда и змеевика

Животным давали доступ к пище и воде ad libitum в течение следующих 14 дней, а затем змеевики собирали из CCA. Анестезию вызывали внутрибрюшинной инъекцией 60 мг / кг пентобарбитала натрия, и животных умерщвляли внутрисердечной инъекцией 60 мг / кг пентобарбитала натрия. Был открыт предыдущий разрез и обнажена ОСА. Сегмент CCA, содержащий катушку, был удален (длиной примерно 10 мм) и разрезан пополам, а сегмент катушки был осторожно удален.Спираль и сегменты CCA были помещены в формалин для консервации. У семи животных контралатеральная ОСА была резецирована и сохранена в формалине для рассечения. Эти образцы использовались в качестве контралатерального контроля CCA.

Гистопатология

Фиксированные формалином сегменты ОСА залили парафином и сделали срезы толщиной 6 мкм мкм. Каждый образец окрашивали гематоксилином и эозином (H&E) в соответствии со стандартными протоколами. Образцы с фиброзным материалом в просвете подвергались иммуногистохимическому анализу с антителами к фактору VIII (Accurate Chemicals, Westbury, NY) для оценки присутствия этого эндотелиального антигена.Сегменты спирали сохраняли в формалине и визуализировали с помощью сканирующей электронной микроскопии (SEM). Для полуколичественной патологической оценки один наблюдатель, который не знал о группах модификации спирали, оценивал гистопатологические срезы. Оценки основывались на степени пролиферации интимы (0–3), проценте окклюзии интимы (%) и степени фиброза (0–3).

Гистопатологические срезы срезов CCA также просматривали с помощью микроскопа (Axiovert 135, Carl Zeiss, Thornwood, NJ) и оцифровывали с помощью калиброванной камеры CCD (Hamamatsu Phototonics, Inc., Бриджуотер, штат Нью-Джерси). Оцифрованные изображения были получены с помощью фрейм-граббера на рабочей станции Dell (Dell Computers, Round Rock, TX). На рабочей станции оцифрованные изображения анализировали с помощью программного обеспечения Image Analysis (UTHSCSA Image Tool, Сан-Антонио, Техас), которое позволяло количественно измерять площадь просвета, окружность и толщину стенки. Площадь просвета рассчитывалась прямым измерением периметра «открытого» просвета (отверстия). Периметр по большей части не пострадал от деформации ткани при фиксации.Площадь, занимаемая удаленной катушкой, способствовала этому «патентованному» диаметру просвета. Учитывая большое количество реплик в каждой группе, было неожиданным, что артефакт обработки одинаковым образом изменит геометрию всех шести образцов в одной группе.

Каждый набор данных был выражен как среднее значение ± стандартное отклонение для количества сосудов, проанализированных в каждом наборе. Двусторонний тест t использовался для определения статистической разницы между группами лечения с поправкой Бонферрони для множественных сравнений с CCA с немодифицированной катушкой.

Результаты

Всего было выполнено 25 процедур, 31 сегмент артерии был взят и сгруппирован в контроль (n = 6), спираль (n = 9), спираль + коллаген (n = 5) и спираль + коллаген / rhVEGF (n = 11). Контрольная группа (n = 6) состояла из контрольных сосудов, взятых из контралатеральной ОСА, не имевшей катушки или хирургического разрыва. При сборе немодифицированных спиралей в разрезе ОСА проявлялся минимальный фиброз вокруг спирали или в стенке сосуда при визуализации с помощью хирургического микроскопа.Однако спирали, покрытые коллагеном / rhVEGF, демонстрировали явные доказательства тромбоза и фиброза при удалении. Репрезентативные срезы из каждой группы, окрашенные H и E, показаны на Фигуре 2. На Фигуре 2D показана массивная гиперплазия интимы и существенная организация сгустка для спиралей, покрытых коллагеном / rhVEGF.

Гистопатологические данные (окрашенные H&E) в сегментах ОСА для каждой группы после 14-дневной имплантации спирали (исходное увеличение × 20).

A, Контралатеральный контроль.

B, Катушка.

C, Спираль + коллаген. D, Спираль + коллаген / rhVEGF.

Оценка патологии

Результаты слепой оценки патологии суммированы в Таблице 1 с классификацией пролиферации интимы (0–3), процентом окклюзии интимы (%) и степенью фиброза (0–3). Пролиферацию интимы оценивали по шкале от 0 для контрольного сегмента CCA, 1 для умеренной пролиферации, 2 для умеренной пролиферации и 3 для тяжелой пролиферации.Степень пролиферации интимы была значительно выше для спирали + коллаген / rhVEGF (2,8 ± 0,40) по сравнению с одной спиралью (1,4 ± 0,73; P <0,001) и спиралью + коллаген (1,6 ± 0,55; P <0,001) . Процент окклюзии, определенный с использованием контрольного сосуда как 0% окклюзии, показал постепенное увеличение спирали (18% ± 11%), спирали + коллаген (39% ± 20%) и спирали + коллагена / rhVEGF (87% ± 6%). ). Процент окклюзии был значительно выше при сравнении спирали + коллаген / rhVEGF с одной спиралью ( P <.001) и спираль + коллаген ( P <.001). Фиброз артериальной стенки оценивался по шкале от 0 для контрольного сегмента ОСА, 1 для легкого фиброза, 2 для умеренного фиброза и 3 для тяжелого фиброза. Фиброз был значительно выше в группе спираль + коллаген / rhVEGF (2,6 ± 0,50) по сравнению с одной спиралью (1,4 ± 0,55; P <0,001) и незначительно значимым по сравнению со спиралью + коллаген (2,0 ± 0,71; P ). = 0,06).

Средние баллы патологии ± стандартное отклонение слепого наблюдателя для пролиферации интимы, нарушения внутренней эластической пластинки и фиброза

Количественное определение изменений сосудов

Через 14 дней имплантации средняя площадь просвета ОСА была равна 0.21 ± 0,11 мм ² только с катушкой, 0,13 ± 0,08 мм ² со спиралью + коллаген и 0,03 ± 0,02 мм ² со спиралью + коллаген / rhVEGF (таблица 2 и рисунок 3A). Средняя площадь просвета ОСА была значительно меньше при использовании спирали + коллаген / rhVEGF по сравнению с одной спиралью ( P <0,001) и спиралью + коллаген ( P <0,001). Средний диаметр просвета ОСА составлял 0,50 ± 0,15 мм для одной спирали, 0,40 ± 0,12 мм для спирали + коллаген и 0,19 ± 0,08 мм для спирали + коллаген / rhVEGF (таблица 2 и рис. 3B).Средний диаметр просвета ОСА для спирали + коллаген / rhVEGF был значительно меньше, чем для одной спирали ( P <0,001) и спирали + коллаген ( P <0,001). Средняя толщина стенки ОСА составляла 0,09 ± 0,03 мм с одной спиралью, 0,15 ± 0,05 мм со спиралью + коллаген и 0,22 ± 0,08 мм со спиралью + коллаген / rhVEGF (таблица 2 и рис. 3C). Средняя толщина стенки CCA со спиралью + коллаген / rhVEGF была значительно больше, чем у одной спирали ( P <0,001) и незначительно значимой по сравнению со спиралью + коллаген / rhVEGF ( P =.06).

Среднее ± стандартное отклонение площади, диаметра и толщины стенки

Столбчатые диаграммы, сравнивающие результаты количественного анализа.

A, площадь люмен.

B, Диаметр люмена.

C, Толщина стенки емкости.

Иммуноокрашивание фактора VIII

Гистопатологические срезы CCA из спирали + коллаген / rhVEGF окрашивали фактором VIII для оценки присутствия эндотелиальных клеток (фиг. 4).В контрольной CCA положительность фактора VIII можно увидеть вдоль эндотелия (рис. 4A). Однако срезы, показанные на Фигуре 2D, показали положительное окрашивание на Фактор VIII в областях неоваскуляризации в массе фиброзной ткани (Фиг.4B).

Иммуногистохимическое окрашивание на фактор VIII.

A, Контрольный срез CCA, показывающий положительное окрашивание вдоль эндотелия (исходное увеличение × 40).

B, Срез CCA из спирали, покрытой коллагеном / rhVEGF с положительным окрашиванием в областях неоваскуляризации (исходное увеличение × 40).

Сканирующая электронная микроскопия

Сканирующая электронная микроскопия была проведена на сегментах катушки из разных исследовательских групп (рис. 5). Немодифицированные спирали показали минимальное накопление фиброза на поверхности (фиг. 5A), и были свидетельства немного большего фиброза на тех спиралях, модифицированных коллагеном (фиг. 5B). Спирали, покрытые коллагеном / rhVEGF, показали большее накопление клеточного мусора на поверхности, чем только спираль или спираль + коллаген (рис. 5C).

СЭМ поверхностей сегментов катушек разных групп.

A, Катушка без изменений (оригинальное увеличение × 200).

B, Coil + collagen (исходное увеличение × 200).

C, Катушка + коллаген / rhVEGF (исходное увеличение × 150). Обратите внимание на интенсивную клеточную реакцию со спиралью + коллаген / rhVEGF.

Обсуждение

Основная цель терапии GDC — плотно закрыть аневризму спиралями, чтобы способствовать тромбозу, фиброзу и, в конечном итоге, эндотелизации через отверстие аневризмы.Однако недавние данные гистопатологического наблюдения начали подчеркивать некоторые потенциальные ограничения терапии GDC. Гистопатологические характеристики аневризм человека, подвергнутых лечению GDC, оценивались при вскрытии (10–16). Как правило, аневризмы могут казаться полностью закрытыми при ангиографии; однако гистопатологическое наблюдение показало, что неорганизованный сгусток и небольшие пространства для жидкости могут существовать между спиралями в аневризме, леченной иным образом. Хотя микрокатушки, упакованные в аневризму, обеспечивают основу, которая может способствовать общей стабильности аневризмы и образованию тромбов из-за застоя, платина относительно биологически инертна.Модификация поверхности, которая увеличивает биологическую активность, может улучшить эту технологию и сделать терапию GDC более эффективной. В предыдущих исследованиях использовались модели in vitro и in vivo для изучения модификации поверхности GDC белками внеклеточного матрикса (1, 3, 7, 17, 18), небиоразлагаемыми полимерами (5, 19) и ионизирующим излучением (6) и покрытиями. клубки с иммортализованными фибробластами, секретирующими факторы роста (3, 4).

Полиуретаны и полиэфиры используются для увеличения площади поверхности спирали, а тканевые нити усиливают тромбогенность (1, 5).Другие использовали коллаген I типа для покрытия поверхности GDC и показали лучший клеточный ответ с большим количеством эндотелия по сравнению с неизмененными спиралями (1, 18). Другая модификация — заполнение центра спиралей коллагеном, что увеличивает количество фибробластов на спиралях по сравнению с контролем (2, 7). Мурамая и др. (6) покрыли GDC альбумином, фибронектином и коллагеном и подвергли их имплантации высокоэнергетических ионов неона. Их результаты показали, что покрытые фибронектином спирали, подвергшиеся воздействию высокой энергии, показали наибольшую острую тромбогенность.Kallmes et al (4) генетически модифицированные фибробласты плазмидой с основным фактором роста фибробластов (bFGF), выращенной в культуральной среде со спиралями. Эти спирали показали большую пролиферацию фибробластов по сравнению с немодифицированными спиралями при помещении в ОСК.

VEGF — мощный ангиогенный фактор роста с прямым и специфическим митогенным действием на эндотелиальные клетки (20, 21). В местных тканевых ответах VEGF и bFGF обладают синергическим действием на дифференцировку эндотелиальных клеток и ангиогенез.Исследования показали, что экспрессия мРНК VEGF и последующий ангиогенез увеличиваются в областях гипоксических клеток in vitro и вблизи некротических областей клеток глиобластомы in vivo (22–24). Было показано, что интракоронарная инъекция рекомбинантного VEGF (25), плазмиды, кодирующей VEGF (26), или аденовируса, используемого для экспрессии VEGF (27), способствует развитию коллатеральных сосудов в ишемизированной ткани миокарда. Кроме того, VEGF может способствовать коллатеральному ангиогенезу у пациентов с критической ишемией конечностей после внутримышечной инъекции (28, 29) и у пациентов с ишемическим миокардом после интракоронарной (25) и интрамиокардиальной инъекции (26, 27).

Хотя VEGF играл важную роль в исследованиях, в основном сфокусированных на ангиогенезе и формировании коллатералей при ишемии миокарда и нижних конечностей в условиях высокого кровотока, мы предположили, что VEGF может стимулировать тканевый ответ при нанесении на GDC в условиях стаза и повышения давления. . Гистопатологическое наблюдение после терапии GDC показало фиброз аневризмы, наиболее выраженный на периферии, что позволяет предположить, что модификации спирали, способствующие реакции по всему куполу, могут быть полезными.При использовании рекомбинантного фактора роста rhVEGF, высвобождаемый из спирали, может обеспечивать биологическую активность, необходимую для индукции фиброза в сосудистой структуре.

В этом исследовании сегменты CCA, обработанные спиралью + коллаген / rhVEGF, показали выраженный тканевый ответ в просвете сосуда и накопление на самой спирали с помощью SEM. Иммуноокрашивание фактором VIII подтвердило наличие неоваскуляризации в фиброзной тканевой массе, предполагая, что rhVEGF, нанесенный на GDC, может усиливать пролиферацию ткани, особенно в более крупных спиральных аневризмах.Хотя возможно, что rhVEGF обладает тромбогенным потенциалом, отличным от его активности фактора роста, было бы трудно отличить этот тромбогенный потенциал от массивного ответа, ожидаемого от действия одного только коллагена на небольшой пул крови, доступный для свертывания во время свертывания. лигирование в этой модели без потока. Начальное соотношение коллагена к rhVEGF на спирали составляет около 6: 1 во время имплантации.

В отличие от предшествующей ангиогенной работы с доставкой или экспрессией VEGF после прямой инъекции в мышцу или артерии, лигированная артерия не обеспечивает доступного микрососудистого русла для рекрутирования клеток, образования неокапилляров или перфузии эритроцитов.Это может объяснить, почему капилляры и эритроциты не были обнаружены в течение 2 недель в формирующей фиброзной ткани в просвете перевязанного сосуда.

Оценка поверхности спирали после удаления может зависеть от адгезии материала (фиброз по сравнению с неорганизованной тканью) к спирали по сравнению с сцеплением этого материала с сосудом. По-прежнему возможно, что «более чистые» спирали могут быть извлечены из фиброзных аневризм, в то время как материал может быть удален с помощью спирали из неорганизованной ткани в просвете сосуда.Нам не известны какие-либо прямые исследования, оценивающие силу адгезии фиброза, неорганизованной ткани или сгустка крови к платиновым микропоточкам. Однако массивная организация просветной ткани в сосудах, имплантированных спиралями, покрытыми rhVEGF, согласуется с наблюдением фиброзной (свободной от тромбов) инкрустации поверхностей спиралей, покрытых rhVEGF, по данным SEM.

Ожидается, что усиленный кровоток в контралатеральном контроле вызовет некоторое расширение и увеличение диаметра просвета, хотя изменения толщины стенки могут быть небольшими в 2-недельный момент времени.Мы также использовали сопоставимых по весу животных с нормальными левой и правой сонными артериями в качестве доноров для контрольной группы и не обнаружили серьезных отличий от контралатеральных сосудов, полученных от крыс с односторонним лигированием. Хотя мы использовали простую модель in vivo, а не экспериментально созданную аневризму, добавление rhVEGF в спираль не очевидно на основании его использования при ишемии миокарда. Наши результаты показывают, что rhVEGF усиливает фиброз и индуцирует образование новых кровеносных сосудов, которые могут улучшить фиброз через купол более крупных аневризм.Помимо рекомбинантной экспрессии, VEGF также может экспрессироваться через плазмиду или аденовирус.

Заключение

Мы показали на модели артериального застоя и повышения давления in vivo, что rhVEGF, добавленный к поверхности GDC, обеспечивает усиленный клеточный ответ по сравнению с немодифицированными спиралями и спиралями, модифицированными коллагеном. Наши результаты показывают, что факторы с повышенной биологической активностью, которые добавляются к GDC, могут вызывать лучшую фиброзную реакцию и улучшать частоту окклюзии аневризм, особенно больших и / или с широкими шейками.Следующим шагом будет использование спиралей, модифицированных rhVEGF, в экспериментальных аневризмах яремной вены для сравнения их эффективности с другими модификациями поверхности GDC.

Благодарности

Авторы хотели бы поблагодарить Target Therapeutics, Inc. за их вклад в съемные катушки Guglielmi и Genentech, Inc. за вклад rhVEGF.

Footnotes

• 1 Представлено устно на четвертом ежегодном заседании секции AANS / CNS по цереброваскулярной хирургии на Биг-Айленде, Гавайи, 9–12 февраля 2001 г.

• ↵2 Запросы на перепечатку адресовать Джону М. Абрахамсу, доктору медицины, отделение нейрохирургии, Silverstein 5, The Hospital of the University of Pennsylvania, 3400 Spruce Street, Philadelphia, PA 19104.

Ссылки

1. ↵

   Dawson RC, Krisht AF, Barrow DL, Joseph GJ, Shengelaia GC, Bonner G. Лечение экспериментальных аневризм с использованием покрытых коллагеном микрокатушек. Neurosurgery 1995; 36: 133-140

2. ↵

   Dawson RC, Shengelaia GG, Krisht AF, Bonner GD. Гистологические эффекты соединяющихся отделяемых спиралей, заполненных коллагеном, при удалении экспериментальных аневризм у свиней. AJNR Am J Neuroradiol 1996; 17: 853-858

3. ↵

   Kallmes DF, Borland MK, Altes TA, Dion JE, Jensen ME, Hankins GR, Helm GA. In vitro пролиферация и адгезия фибробластов, продуцирующих основной фактор роста фибробластов, на платиновых спиралях. Радиология 1998; 206: 237-243

4. ↵

   Kallmes DF, Williams AD, Cloft HJ, Lopez MBS, Hankins GR, Helm GA. Имплантация с помощью платиновой спирали эндоваскулярных тканевых трансплантатов, секретирующих фактор роста: исследование in vivo. Радиология 1998; 207: 519-523

5. ↵

   Kwan ESK, Heilman CB, Roth PA. Эндоваскулярная упаковка аневризм бифуркации сонной артерии платиновыми спиралями, покрытыми полиэфирным волокном, на модели кролика. AJNR Am J Neuroradiol 1993; 14: 323-333

6. ↵

   Murayama Y, Vinuela F, Suzuki Y, Do HM, Massoud TF, Guglielmi G и др. Ионная имплантация и белковое покрытие съемных спиралей для эндоваскулярного лечения церебральных аневризм: концепции и предварительные результаты на моделях свиней. Neurosurgery 1997; 40: 1233-1244

7. Szikora I, Wakhloo AK, Guterman LR, Chavis TD, Dawson RC, Hergenrother RW, et al. Первый опыт использования съемных спиралей Гульельми, наполненных коллагеном, для эндоваскулярного лечения экспериментальных аневризм. AJNR Am J Neuroradiol 1997; 18: 667-672

8. ↵

   Muhlhauser J, Merrill MJ, Pili R, Maeda H, Bacic M, Bewig B, et al. VEGF165, экспрессируемый рекомбинантным аденовирусным вектором с дефицитом репликации, индуцирует ангиогенез in vivo. Circ Res 1995; 77: 1077-1086

9. ↵

   Safi J, Gloe TR, Riccioni T, Kovesdi I, Capogrossi MC. Генная терапия с ангиогенными факторами: новый потенциальный подход к лечению ишемических заболеваний. J Mol Cell Cardiol 1997; 29: 2311-2325

10. ↵

    Bavinzski G, Talazoglu V, Killer M, Richling B, Gruber A, Gross CE, Plenk H. Макроскопические и микроскопические гистопатологические находки в аневризмах головного мозга человека, обработанных съемными спиралями Гульельми. J Neurosurg 1999; 91: 284-293

11. Castro E, Fortea F, Villoria F, Lacruz C, Ferreras B, Carrillo R. Долгосрочные гистопатологические находки в двух церебральных аневризмах, эмболизированных съемными кольцами Гульельми. AJNR Am J Neuroradiol 1999; 20: 549-552

12. Horowitz MB, Purdy PD, Burns D, Bellotto D. Результаты сканирующей электронной микроскопии аневризмы базилярного кончика, эмболизированной съемными спиралями Гульельми. AJNR Am J Neuroradiol 1997; 18: 688-690

13. Mizoi K, Yoshimoto T., Takahashi A, Nagamine Y. Ловушка в хирургии рецидивирующей аневризмы после спиральной эмболии и ее гистологическое наблюдение: технический случай отчет. Neurosurgery 1996; 39: 165-169

14. Molyneux AJ, Ellison DW, Morris J, Byrne JV. Гистологические данные гигантских аневризм, леченных съемными спиралями Гульельми. Отчет о двух случаях вскрытия корреляции. J Neurosurg 1995; 83: 129-132

15. Shimizu S, Kurata A, Takano M, Takagi H, Yamazaki H, Miyasaka Y, Fujii K. Тканевый ответ небольшой мешковидной аневризмы после неполной окклюзии с помощью Съемная катушка Гульельми. AJNR Am J Neuroradiol 1999; 20: 546-548

16. Стивер С.И., Портер П.Дж., Виллинский Р.А., Уоллес М.К. Острая гистопатология внутричерепной аневризмы у человека, леченная с помощью отделяемых спиралей Гульельми: описание случая и обзор литературы. Neurosurgery 1998; 43: 1203-1208

17. Таматани С., Озава Т., Минакава Т., Такеучи С., Киоке Т., Танака Р. Гистологическое взаимодействие культивируемых эндотелиальных клеток и эндоваскулярных эмболических материалов, покрытых внеклеточным матриксом. J Neurosurg 1997; 86: 109-112

18. Таматани С., Одзава Т., Минакава Т., Такеучи С., Киоке Т., Танака Р. Радиологическая и гистопатологическая оценка окклюзии собачьей артерии после введения покрытой коллагеном платиновой микровибрации. AJNR Am J Neuroradiol 1999; 20: 541-545

19. Ahuja AA, Hergenrother RW, Strother CM, Rappe AA, Cooper SL, Graves VB. Платиновые спиральные покрытия для повышения тромбогенности: предварительное исследование на кроликах. AJNR Am J Neuroradiol 1993; 14: 794-798

20. ↵

    Ferrara N, Henzel WJ. Фолликулярные клетки гипофиза секретируют новый гепарин-связывающий фактор роста, специфичный для эндотелиальных клеток сосудов. Biochem Biophys Res Commun 1989; 161: 851-855

21. Conn G, Soderman D, Schaeffer MT, Wile M, Hatcher VB, Thomas KA. Очистка митогена гликопротеиновых эндотелиальных клеток сосудов из линии клеток, полученных из глиомы крысы. Proc Natl Acad Sci U S A 1990; 87: 1323-1327

22. ↵

    Ladoux A, Frelin C. Гипоксия является сильным индуктором экспрессии мРНК фактора роста эндотелия сосудов в сердце. Biochem Biophys Res Commun 1993; 195: 1005-1010

23. Plate KH, Breier G, Millauer B, Ullrich A, Risau W. Повышающая регуляция фактора роста эндотелия сосудов и его родственных рецепторов в модели опухолевого ангиогенеза глиомы крысы. Cancer Res 1993; 53: 5822-5827

24. Shweiki D, Itin A, Soffer D, Keshet E. Фактор роста эндотелия сосудов, индуцированный гипоксией, может опосредовать индуцированный гипоксией ангиогенез. Nature 1992; 359: 843-845

25. ↵

    Hendel RC, Henry TD, Rocha-Singh K, Isner JM, Kereiakes DJ, Giordano FJ, et al. Влияние внутрикоронарного рекомбинантного фактора роста эндотелия сосудов человека на перфузию миокарда: данные о дозозависимом эффекте. Circulation 2000; 101: 118-121

26. ↵

    Losordo DW, Vale PR, Symes JF, Dunningham CH, Esakof DD, Maysky M, et al. Генная терапия ангиогенеза миокарда: первоначальные клинические результаты с прямой инъекцией в миокард phVEGF165 в качестве единственной терапии ишемии миокарда. Circulation 1998; 98: 2800-2804

27. ↵

    Rosengart TK, Lee LY, Patel SR, Kligfield PD, Okin PM, Hackett NR, et al. Шестимесячная оценка фазы I испытания ангиогенной генной терапии для лечения ишемической болезни сердца с использованием прямого интрамиокардиального введения аденовирусного вектора, экспрессирующего кДНК VEGF121. Ann Surg 1999; 230: 466-470

28. ↵

    Baumgartner I, Pieczek A, Manor O, Blair R, Kearney M, Walsh K, et al. Конститутивная экспрессия phVEGF165 после внутримышечного переноса гена способствует развитию коллатеральных сосудов у пациентов с критической ишемией конечностей. Circulation 1998; 97: 1114-1123

29. Isner JM, Pieczek A, Schainfeld R, Blair R, Haley L, Asahara T, et al.